POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Limfna filariaza, znana kot Elephantiasis, ki jo povzročata predvsem W. bancrofti in B. malayi, prizadene približno 120 milijonov ljudi v več kot 80 državah.Bolezen se na človeka prenaša s piki okuženih komarjev, v katerih se iz okuženega človeka izsesane mikroflare razvijejo v ličinke tretjega stadija.Na splošno je za vzpostavitev okužbe pri ljudeh potrebna ponavljajoča se in dolgotrajna izpostavljenost okuženim ličinkam.
Dokončna parazitološka diagnoza je dokaz mikroflarij v vzorcih krvi.Vendar je ta test zlatega standarda omejen z zahtevo po nočnem odvzemu krvi in pomanjkanjem ustrezne občutljivosti.Odkrivanje krožečih antigenov je komercialno dostopno.Njegova uporabnost je omejena za W. bancrofti.Poleg tega se mikrofilaremija in antigenemija razvijeta nekaj mesecev ali let po izpostavljenosti.
Odkrivanje protiteles je zgodnje sredstvo za odkrivanje okužbe s filarialnimi paraziti.Prisotnost IgM pri antigenih parazitov kaže na trenutno okužbo, medtem ko IgG ustreza pozni fazi okužbe ali pretekli okužbi.Poleg tega identifikacija ohranjenih antigenov omogoča uporabo testa "pan-filaria".Uporaba rekombinantnih proteinov odpravi navzkrižno reakcijo s posamezniki, ki imajo druge parazitske bolezni.
Kombinirani hitri test filariasis IgG/IgM uporablja ohranjen rekombinant
antigene za hkratno odkrivanje IgG in IgM za parazite W. bancrofti in B. malayi brez omejitve zbiranja vzorcev.
NAČELO
Komplet za hitri test IgG/IgM za filariazo je kromatografski imunološki test s stranskim tokom.Testna kaseta je sestavljena iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje rekombinantne navadne antigene W. bancrofti in B. malayi, konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati Filariaze) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak iz nitrocelulozne membrane, ki vsebuje dva testna trakova (trakova M in G) in kontrolni pas (trak C).Trak M je predhodno prevlečen z monoklonskim protičloveškim IgM za odkrivanje IgM proti W. bancrofti in B. malayi, trak G je predhodno prevlečen z reagenti za odkrivanje IgG proti W.bancrofti in B. malayi, pas C pa je predhodno prevlečen s kozjimi proti kunčjimi IgG.
Ko je ustrezen volumen preskusnega vzorca odmerjen v jamico za vzorec v kaseti, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.Protitelesa IgM W. bancrofti ali B. malayi, če so prisotna v vzorcu, se bodo vezala na konjugate Filariaze.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim protitelesom proti humanim IgM, pri čemer se tvori bordo obarvan M pas, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgM W. bancrofti ali B. malayi.
Protitelesa IgG W. bancrofti ali B. malayi, če so prisotna v vzorcu, se bodo vezala na konjugate Filariaze.Imunokompleks nato zajamejo predhodno prevlečeni reagenti na membrani in tvorijo bordo obarvan pas G, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgG W. bancrofti ali B. malayi.
Odsotnost testnih pasov (M in G) pomeni negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (trak C), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega proti kunčjega IgG/kunčjega IgG-konjugata zlata, ne glede na razvoj barve na katerem koli testnem traku.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.