POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Visceralna lišmanioza ali Kala-azar je razširjena okužba, ki jo povzroča več podvrst L. donovani.Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) ocenjuje, da bolezen prizadene približno 12 milijonov ljudi v 88 državah.Na človeka se prenaša z ugrizi peščene muhe Phlebotomus, ki se okuži s prehranjevanjem z okuženimi živalmi.Čeprav gre za bolezen, ki jo najdemo v revnih državah, je v južni Evropi postala vodilna oportunistična okužba pri bolnikih z aidsom.Identifikacija organizma L. donovani iz krvi, kostnega mozga, jeter, bezgavk ali vranice zagotavlja natančno diagnozo.Serološko odkrivanje anti-L.donovani IgM je odličen marker za akutno visceralno lišmaniozo.Testi, ki se uporabljajo v kliniki, so vključeni ELISA, fluorescenčna protitelesa ali neposredni aglutinacijski testi 4-5.Pred kratkim je uporaba specifičnega proteina L. donovani v testu dramatično izboljšala občutljivost in specifičnost.
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test je serološki test na osnovi rekombinantnih beljakovin, ki hkrati zazna protitelesa IgG in IgM proti L. Donovani.Test zagotavlja zanesljiv rezultat v 15 minutah brez instrumentov.
NAČELO
Hitri test IgG/IgM za Leishmania je imunološki kromatografski test z bočnim tokom.Testno kaseto sestavljajo: 1) bordo obarvana konjugirana blazinica, ki vsebuje rekombinantni antigen L. donovani, konjugiran s koloidnim zlatom (konjugati Leishmania) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak iz nitrocelulozne membrane, ki vsebuje dva testna trakova (trakova T1 in T2) in kontrolni pas (C pas).Trak T1 je predhodno prevlečen z monoklonskim protičloveškim IgM za odkrivanje anti-L.donovani IgM, je pas T2 predhodno prevlečen z reagenti za odkrivanje anti-L.donovani IgG, pas C pa je predhodno prevlečen s kozjim proti kunčjim IgG.
Ko je ustrezen volumen preskusnega primerka odmerjen v vdolbino za vzorec v kaseti, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.Če je IgM L. donovani prisoten v vzorcu, se bo vezal na konjugate Leishmania.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim protitelesom proti humanim IgM in tvori bordo obarvan pas T1, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgM L. donovani.IgG L. donovani, če je prisoten v vzorcu, se bo vezal na konjugate Leishmania.Imunokompleks nato ujamejo predhodno prevlečeni reagenti na membrani, pri čemer se tvori bordo obarvan pas T2, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgG L. donovani.
Odsotnost trakov T (T1 in T2) kaže na negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C trak), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega proti kunčjega IgG/kunčjega IgG-konjugata zlata, ne glede na razvoj barve na katerem koli od T trakov.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
