POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Driska je eden od glavnih vzrokov obolevnosti in umrljivosti otrok po vsem svetu, zaradi česar vsako leto umre 2,5 milijona ljudi.Okužba z rotavirusi je glavni vzrok za hudo drisko pri dojenčkih in otrocih, mlajših od pet let, saj predstavlja 40–60 % akutnega gastroenteritisa in vsako leto povzroči približno 500.000 smrti otrok.Do petega leta starosti je bil skoraj vsak otrok na svetu vsaj enkrat okužen z rotavirusom.Pri poznejših okužbah se izzove širok, heterotipski odziv protiteles;zato so odrasli redko prizadeti.
Do danes je bilo izoliranih sedem skupin rotavirusov (skupine AG) in
značilno.Rotavirus skupine A, najpogostejši rotavirus, povzroči več kot 90 % vseh okužb z rotavirusom pri ljudeh.Rotavirus se prenaša predvsem po fekalni poti, neposredno od osebe do osebe.Titri virusa v blatu dosežejo najvišjo vrednost kmalu po začetku bolezni, nato pa upadejo.Inkubacijska doba rotavirusne okužbe običajno traja od enega do treh dni, sledi pa ji gastroenteritis, ki v povprečju traja od tri do sedem dni.Simptomi bolezni segajo od blage vodene driske do hude driske s povišano telesno temperaturo in bruhanjem.
Diagnozo okužbe z rotavirusom je mogoče postaviti po diagnozi gastroenteritisa kot vzroka hude driske pri otrocih.Pred kratkim je postala na voljo specifična diagnoza okužbe z rotavirusom z odkrivanjem antigena virusa v blatu z metodami imunskega testa, kot je test lateksne aglutinacije, EIA in kromatografski imunološki test z lateralnim tokom.
Hitri test Rotavirus Ag je kromatografski imunotest z lateralnim tokom, ki uporablja par specifičnih protiteles za kvalitativno odkrivanje antigena rotavirusa v fekalnem vzorcu.Test je mogoče izvesti brez okorne laboratorijske opreme, rezultati pa so na voljo v 15 minutah.
NAČELO
Hitri test Rotavirus Ag je kromatografski imunološki test z bočnim tokom.Testni trak je sestavljen iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje monoklonsko protitelo proti rotavirusu, konjugirano s koloidnim zlatom (konjugati proti rotavirusu), in kontrolno protitelo, konjugirano s koloidnim zlatom, 2) trak z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje testno črto (T linija) in krmilna linija (C linija).Linija T je predhodno prevlečena z drugim monoklonskim protitelesom proti rotavirusu, linija C pa je predhodno prevlečena s protitelesom kontrolne linije.
Ko je ustrezen volumen ekstrahiranega vzorca odmerjen v jamico za vzorec testne kasete, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.Rotavirus Ag, če je prisoten v vzorcu, se veže na anti-rotavirusne konjugate.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim rotavirusnim protitelesom, ki tvori bordo obarvano linijo T, kar kaže na pozitiven rezultat testa na rotavirus. Odsotnost črte T nakazuje, da je koncentracija rotavirusnega Ag v vzorcu pod zaznavno ravnjo, kar kaže na negativen rezultat rotavirusa.Test vsebuje notranjo kontrolo (črta C), ki mora pokazati bordo obarvano linijo imunokompleksa kontrolnih protiteles, ne glede na razvoj barve na črti T.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
