POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Chikungunya je redka virusna okužba, ki se prenaša z ugrizom okuženega komarja Aedes aegypti.Zanj so značilni izpuščaj, zvišana telesna temperatura in hude bolečine v sklepih (artralgije), ki običajno trajajo tri do sedem dni.Ime izhaja iz besede Makonde, ki pomeni »tisto, kar se upogne« v zvezi s sklonjeno držo, ki se je razvila kot posledica artritičnih simptomov bolezni.Pojavlja se v deževnem obdobju
v tropskih predelih sveta, predvsem v Afriki, jugovzhodni Aziji, južni Indiji in Pakistanu.Simptomi se najpogosteje klinično ne razlikujejo od simptomov, opaženih pri mrzlici denga.V Indiji so dejansko poročali o dvojni okužbi z dengo in čikungunjo.Za razliko od denge so hemoragične manifestacije razmeroma redke in najpogosteje je bolezen samoomejujoča vročinska bolezen.Zato je zelo pomembno
za klinično razlikovanje dengue od okužbe s CHIK.CHIK se diagnosticira na podlagi serološke analize in izolacije virusa pri miših ali tkivni kulturi.Imunski test IgM je najbolj praktična laboratorijska testna metoda.Hitri test Chikungunya IgG/IgM uporablja rekombinantne antigene, pridobljene iz njegove strukturne beljakovine, zazna IgG/IgM anti-CHIK v bolnikovem serumu ali plazmi v 20 minutah.Test lahko izvajajo neusposobljeni oz
minimalno usposobljeno osebje, brez okorne laboratorijske opreme.
NAČELO
Hitri test antigena Chikungunya IgG/IgM+NS1 je imunološki kromatografski test z bočnim tokom.Testna kaseta je sestavljena iz traku IgG/IgM in traku NS1.
IgG/IgM trak: 1) bordo obarvana konjugatna blazinica, ki vsebuje antigene rekombinantne ovojnice Chikungunya, konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati denga) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje dva testna trakova (trakova G in M) in kontrolni pas (pas C).Pas G je predhodno prevlečen s protitelesom za odkrivanje IgG proti virusu Chikungunya, pas M je prevlečen s protitelesi za odkrivanje IgM proti virusu Chikungunya, pas C pa je predhodno prevlečen s kozjimi proti kunčjim IgG.
Trak NS1: 1) bordo obarvana konjugirana blazinica, ki vsebuje mišji antigen NS1 proti Chikungunya, konjugiran s koloidnim zlatom (konjugati Chikungunya Ab), 2) trak z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje testni pas (trak T) in kontrolni pas (trak C).Trak T je predhodno prevlečen s kunčjim antigenom proti Chikungunya NS1, pas C pa je predhodno prevlečen s protitelesom IgG proti mišjim kozam.
Trak IgG/IgM: Ko je ustrezen volumen testnega vzorca odmerjen v jamico za vzorec testne kasete, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.IgG anti-chikungunya virus, če je prisoten v vzorcu, se veže na konjugate Chikungunya.Imunokompleks nato zajame reagent, prevlečen na pasu G, ki tvori bordo obarvan pas G, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgG za virus Chikungunya in kaže na nedavno ali ponovno okužbo.Virus IgM proti Chikungunya, če je prisoten v vzorcu, se veže na konjugate Chikungunya.Imunokompleks nato zajame reagent, predhodno prevlečen na traku M, ki tvori bordo obarvan pas M, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgM za virus Chikungunya in kaže na svežo okužbo.Odsotnost kakršnih koli testnih pasov (G in M) nakazuje negativen rezultat. Test vsebuje notranjo kontrolo (C pas), ki mora pokazati bordo obarvan pas imunokompleksa kozjega protitelesa IgG proti kuncem.
konjugat kunčjega IgG-gold ne glede na razvoj barve na katerem koli od trakov T.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
Trak NS1: Ko je ustrezen volumen testnega vzorca odmerjen v vdolbino za vzorec v kaseti, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po testni kaseti.Če je Chikungunya NS1 Ag prisoten v vzorcu, se bo vezal na konjugate Chikungunya Ab.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno prevlečenim zajčjim protitelesom proti NS1, pri čemer se tvori bordo obarvan T pas, kar kaže na pozitiven rezultat testa Chikungunya Ag.Odsotnost pasu T kaže na negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C pas), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega anti-mišjega IgG/mišjega IgG-konjugata zlata, ne glede na prisotnost obarvanega T traku.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
