POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Chlamydia pneumoniae (C. pneumoniae) je pogosta vrsta bakterij in glavni povzročitelj pljučnice po vsem svetu.Približno 50 % odraslih ima dokaze o pretekli okužbi do 20. leta, ponovna okužba pozneje v življenju pa je pogosta.Številne študije kažejo na neposredno povezavo med okužbo s C. pneumoniae in drugimi vnetnimi boleznimi, kot so ateroskleroza, akutna poslabšanja KOPB in astma.
Diagnoza okužbe s C. pneumoniae je zahtevna zaradi izbirčne narave patogena, znatne seroprevalence in možnosti prehodnega asimptomatskega prenašalstva.Uveljavljene diagnostične laboratorijske metode vključujejo izolacijo organizma v celični kulturi, serološke teste in PCR. Mikroimunofluorescenčni test (MIF) je trenutni »zlati standard« za serološko diagnozo, vendar test še vedno ni standardiziran in je tehnično zahteven.Imunski testi protiteles so najpogostejši uporabljeni serološki testi, za primarno klamidijsko okužbo pa je značilen prevladujoč odziv IgM v 2 do 4 tednih ter zapozneli odziv IgG in IgA v 6 do 8 tednih.Vendar pa pri ponovni okužbi ravni IgG in IgA hitro narastejo, pogosto v 1-2 tednih, medtem ko se ravni IgM redko odkrijejo.Iz tega razloga so se protitelesa IgA izkazala za zanesljiv imunološki marker primarnih, kroničnih in ponavljajočih se okužb, zlasti v kombinaciji z odkrivanjem IgM.
NAČELO
Hitri test IgG/IgM za Chlamydia pneumoniae temelji na principu kvalitativnega imunokromatografskega testa za določanje protiteles IgG/IgM proti Chlamydia pneumoniae v človeškem serumu, plazmi ali polni krvi. StripA je sestavljen iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje antigen C. pneumoniae, konjugiran s koloidnim zlatom (C. pneumoniae antigen konjugati), 2) trak iz nitrocelulozne membrane, ki vsebuje testni pas (T pas) in kontrolni trak (C pas).Pas T je predhodno prevlečen z mišjim protitelesom proti humanim IgG, pas C pa je predhodno prevlečen s protitelesom kozjega proti mišjem IgG.Trak B je sestavljen iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje antigen C. pneumoniae, konjugiran s koloidnim zlatom (konjugati antigena C. pneumoniae), 2)
trak z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje testni pas (T pas) in kontrolni pas (C pas).Trak T je predhodno prevlečen z mišjim protitelesom IgM proti človeku, pas C pa je predhodno prevlečen s protitelesom IgG koze proti mišjim.
Trak A: Ko je ustrezen volumen preskusnega vzorca odmerjen v vdolbino za vzorec testne kasete, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.C.pneumoniae protitelesa IgG, če so prisotna v vzorcu, se bodo vezala na konjugate antigena C. pneumoniae.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim mišjim protitelesom proti humanemu IgG, ki tvori bordo obarvan T pas,
kar kaže na pozitiven rezultat testa IgG za C. pneumoniae.Odsotnost pasu T kaže na negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C pas), ki mora pokazati bordo obarvan pas imunokompleksa kozjega anti-mišjega IgG/mišjega IgGgold konjugata ne glede na prisotnost obarvanega T pasu.Sicer pa rezultat testa
je neveljaven in vzorec je treba ponovno testirati z drugo napravo.
Trak B: Ko je ustrezen volumen preskusnega vzorca odmerjen v jamico za vzorec testne kasete, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.C.pneumoniae protitelesa IgM, če so prisotna v vzorcu, se bodo vezala na konjugate antigena C. pneumoniae.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim mišjim protitelesom proti humanemu IgM, ki tvori bordo obarvan T pas,
kar kaže na pozitiven rezultat testa IgM za C. pneumoniae.Odsotnost pasu T kaže na negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C pas), ki mora pokazati bordo obarvan pas imunokompleksa kozjega anti-mišjega IgG/mišjega IgGgold konjugata ne glede na prisotnost obarvanega T pasu.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
