POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Malarija je hemolitična vročinska bolezen, ki jo prenašajo komarji in okuži več kot 200 milijonov ljudi in ubije več kot 1 milijon ljudi na leto.Povzročajo jo štiri vrste plazmodijev: P. falciparum, P. vivax, P. ovale in P. malariae.Vsi ti plazmodiji okužijo in uničijo človeške eritrocite, povzročijo mrzlico, vročino, anemijo in splenomegalijo.P. falciparum povzroča hujše bolezni kot druge vrste plazmodijev in je odgovoren za večino smrti zaradi malarije ter je eden od dveh najpogostejših povzročiteljev malarije.
Tradicionalno se malarija diagnosticira s prikazom mikroorganizmov na debelih brisih periferne krvi, obarvanih z Giemso, različne vrste plazmodija pa se razlikujejo po njihovem videzu v okuženih eritrocitih.Tehnika je sposobna natančne in zanesljive diagnoze, vendar le, če jo izvajajo usposobljeni mikroskopisti z uporabo definiranih protokolov, kar predstavlja velike ovire za oddaljene in revne predele sveta.
Hitri test Pf Ag je razvit za reševanje teh ovir.Zazna Pf specifični antigen pHRP-II v vzorcu človeške krvi.Izvaja ga lahko neusposobljeno ali minimalno usposobljeno osebje, brez laboratorijske opreme.
NAČELO
Hitri test Pf Ag je kromatografski imunološki test z bočnim tokom.Komponente testnega traku so sestavljene iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje monoklonsko protitelo proti pHRP-II, konjugirano s koloidnim zlatom (pHRP II-zlati konjugati), 2) traku z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje testni pas (Pf) in kontrolni pas (C pas).Pas Pf je predhodno prevlečen s poliklonskimi protitelesi proti pHRP-II, pas C pa je predhodno prevlečen s kozjim protimišjim IgG.
Med preskusom se ustrezen volumen vzorca krvi odmeri v vdolbino za vzorec (S) testne kasete, v vdolbino pufra (B) pa se doda lizni pufer.Pufer vsebuje detergent, ki lizira rdeče krvne celice in sprosti antigen pHRPII, ki migrira s kapilarnim delovanjem po traku v kaseti.pHRP-II, če je prisoten v vzorcu, se bo vezal na konjugate pHRP II-zlato.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženimi poliklonskimi protitelesi antipHRP II, ki tvorijo bordo obarvan pas Pf, kar kaže na Pf pozitiven rezultat testa.
Odsotnost pasu Pf kaže na negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C pas), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega protimišjega IgG / mišjega IgG (pHRP II–zlati konjugati), ne glede na razvoj barve na katerem koli od pasov Pf.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
