POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Kolera je akutna nalezljiva bolezen, za katero je značilna velika izguba telesnih tekočin in elektrolitov s hudo drisko.Etiološki povzročitelj kolere je identificiran kot Vibrio cholerea (V. Cholerae), gram negativna bakterija, ki se na človeka običajno prenaša z okuženo vodo in hrano.
Vrsto V. Cholerae delimo na več seroloških skupin na osnovi O antigenov.Posebno zanimivi sta podskupini O1 in O139, saj obe lahko povzročita epidemijo in pandemijo kolere.Ključnega pomena je, da se čim prej ugotovi prisotnost V. cholerae O1 in O139 v kliničnih vzorcih, vodi in hrani, da lahko organi javnega zdravstva izvajajo ustrezno spremljanje in učinkovite preventivne ukrepe.
Hitri test Cholera Ag lahko uporablja neposredno na terenu neusposobljeno ali minimalno usposobljeno osebje, rezultat pa je na voljo v manj kot 10 minutah, brez okorne laboratorijske opreme.
NAČELO
Hitri test Cholera Ag je imunski kromatografski test z bočnim tokom.Testna kaseta je sestavljena iz: 1) bordo obarvane konjugirane blazinice, ki vsebuje monoklonsko anti-V.Protitelesa proti koleri O1 in O139, konjugirana s koloidnim zlatom (konjugati protiteles O1/O139) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak z nitrocelulozno membrano, ki vsebuje dva testna traka (1 in 139 pasova) in kontrolni trak (C pas).Pas 1 je predhodno prevlečen z monoklonskim anti-V.Protitelesa proti koleri O1.Pas 139 je predhodno prevlečen z monoklonskim anti-V.Protitelesa proti koleri O139.Trak C je predhodno prevlečen s kozjim protitelesom proti mišjim IgG.
Ko se v vdolbino za vzorec preskusne kasete nanese ustrezen volumen preskusnega vzorca, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.V. Antigen kolere O1/O139, če je prisoten v vzorcu, se bo vezal na ustrezen konjugat zlata O1/O139-protitelo.Ta imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno prevlečenim anti-V.Protitelo proti koleri O1/O139, ki tvori bordo obarvan testni pas, kar kaže na pozitiven rezultat testa za kolero O1/O139.Odsotnost testnega pasu kaže na negativen rezultat.
Test vsebuje notranjo kontrolo (trak C), ki mora pokazati bordo obarvan pas imunokompleksa kozjega anti-mišjega IgG/mišjega IgG-zlato konjugata ne glede na razvoj barve na testnem traku.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.